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miRNA-146a对寻常性银屑病患者外周血CD4+ T细胞的调控研究

2017-04-11 来源:网络 编辑:虎哥

  目的

  研究miRNA-146a对寻常性银屑病患者外周血CD4+T淋巴细胞的调控,探讨miRNA-146a在寻常性银屑病发病中的作用。

  方法

  收集寻常性银屑病患者和健康对照各30例。采用实时定量PCR检测外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-146a表达水平,ELISA检测血浆干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4表达水平。免疫磁珠法分选外周血CD4+T淋巴细胞,将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a组和miRNA-146a抑制物组,分别转染阴性对照miRNA、miRNA-146a模拟物和miRNA-146a抑制物后进行细胞培养,流式细胞仪检测Th1和Th2细胞数量,蛋白免疫印迹法和实时定量PCR分别检测IFN-γ受体α(IFN-γRα)、T细胞表达T盒(T-bet)、GATA-3蛋白和mRNA的表达,ELISA检测细胞培养液上清液IFN-γ、IL-4水平。

  结果

  寻常性银屑病患者外周血CD4+T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-γ水平较健康对照组升高,差异均有统计学意义(均P<0.01),且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关(r=0.837,P<0.01)。体外CD4+T淋巴细胞培养结果显示,与对照组比较,miRNA-146a组Th1数量、T-bet蛋白和mRNA表达、培养上清液IFN-γ水平均显著增加,IFN-γRα蛋白表达降低,差异均有统计学意义(均P<0.01);但是,与对照组比较,miRNA-146a组和miRNA-146a抑制物组Th2细胞数量、GATA-3蛋白、GATA-3mRNA表达以及上清液中IL-4水平差异无统计学意义(均P>0.05)。

  结论

  miRNA-146a可能通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常性银屑病患者外周血CD4+T淋巴细胞的调控,在银屑病发病过程中发挥一定的作用。